Construção de um mutante para o gene sigH codificador do fator sigma alternativo sH e análise do papel desse fator na resposta de Corynebacterium pseudotuberculosis a diferentes condições de estresse ambiental

AUTOR(ES)
FONTE

IBICT - Instituto Brasileiro de Informação em Ciência e Tecnologia

DATA DE PUBLICAÇÃO

28/07/2011

RESUMO

Corynebacterium pseudotuberculosis é uma bactéria Gram-positiva, causadora da linfadenite caseosa em ovinos e caprinos. Para causar uma infecção bem sucedida, este patógeno intracelular facultativo precisa responder de modo eficiente às alterações do ambiente extracelular, sendo capaz de sobreviver às condições adversas encontradas no organismo hospedeiro. Um dos principais mecanismos utilizados por bactérias patogênicas para alcançar este objetivo consiste na ativação transitória de genes específicos de resposta aos estresses ambientais extracelulares por fatores sigma (s) alternativos da RNA polimerase. Com o seqüenciamento do genoma de C. pseudotuberculosis pela Rede Genoma de Minas Gerais e Rede Paraense de Genômica e Proteômica, foi possível identificar sete fatores sigma alternativos nesta bactéria: os fatores sigma B, C, D, E, H, K e M. Dentre estes, destaca-se o fator sH, o qual tem sido associado à irulência em Mycobacterium tuberculosis, uma bactéria filogeneticamente próxima de C. pseudotuberculosis, e à regulação de componentes importantes da resposta aos estresses térmico e oxidativo tanto em M. tuberculosis quanto em Corynebacterium glutamicum. Neste contexto, nosso grupo de pesquisa tem se dedicado ao estudo do papel dos fatores sigma alternativos de C. pseudotuberculosis na resposta a diferentes condições de estresse in vitro e na virulência da bactéria. Neste trabalho, foi construída uma linhagem de C. pseudotuberculosis deficiente para o fator sH, utilizando-se um plasmídeo que não se replica nessa espécie bacteriana, e foi avaliada a resistência desta linhagem aos estresses ácido, térmico, oxidativo e osmótico, in vitro, por meio da comparação das curvas de crescimento da linhagem mutante para o fator sH e da linhagem 1002 selvagem quando expostas às diferentes condições de estresse. Não foram observadas diferenças significativas na susceptibilidade da linhagem mutante para o fator sH aos estresses ácido, térmico e oxidativo em relação à linhagem 1002 selvagem. Contudo, foi verificado que esta linhagem é significativamente mais susceptível ao estresse osmótico do que a linhagem 1002 selvagem, indicando que o fator sH deve desempenhar um papel importante para a resposta da bactéria a esta condição de estresse e, possivelmente, para a sua sobrevivência no interior dos macrófagos e para a sua virulência

ASSUNTO(S)

genética teses. corynebacterium pseudotuberculosis teses. stress teses. stress oxidativo teses. genética bacteriana teses. microorganismos teses. fator sigma decs

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