Congelação do sêmen da espécie canina adicionado de antioxidantes.

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DATA DE PUBLICAÇÃO

2006

RESUMO

Anti-oxidantes funcionam como agentes protetores dos espermatozóides impedindo a formação de espécies de oxigênio reativo (ROS) e conseqüente peroxidação lipidica, aumentando a motilidade e o vigor espermático, e evitando os danos provocados ao DNA. Objetivou-se com este trabalho estudar o efeito da adição de vitamina C e Trolox na congelação de sêmen de cão da raça Cocker Americano. O Pool da segunda fração do sêmen de quatro cães, colhida através de manipulação peniana, foi diluído e suplementado com vitamina C e Trolox na concentração de 200 x 106 espermatozóides/dose, de acordo com cada grupo. Exp. 1: G1= Tris-gema (Controle); G2= Tris-gema + 1200M de vitamina C ; G3= Tris-gema + 2400M de vitamina C; G4= Tris-gema + 100M de Trolox e G5= Tris-gema + 200M de Trolox; Exp. 2: G1= Tris-gema (Controle); G2= Tris-gema + vitamina C (1200M); G3= Tris-gema + vitamina E (200M); G4= Tris-gema + vitamina C (1200M) + E (200M); Exp. 3: G1= Tris-gema ou Kenney (Controle); G2 = Tris-gema ou Kenney + vitamina C (1200 M); G3= Tris-gema ou Kenney + Trolox (200 M); G4= Tris-gema ou Kenney + vitamina C (1200 M) + Trolox (200 M). As amostras foram congeladas utilizando duas curvas (C1 = -0,25 oC/min até 5 oC, -15 oC/min até -5 oC, -10 oC/min até 120 oC; C2 = -0,25 oC/min até 5 oC, -20 oC/min até -5 oC, -20 oC/min até 120 oC), sendo C1 nos Exp. 1, 2 e 3, e C2 no Exp. 2, e armazenadas em nitrogênio líquido. Após descongelação a 37 oC durante 30 segundos, observou-se no Exp.1, motilidade espermática significativamente superior (P<0,05) nos grupos controle e tratados com vitamina C (1200M) ou Trolox (200M). O vigor, a integridade do acrossoma e do DNA, bem como o percentual de células espermáticas coradas com Nitroblue tetrazolium não diferiram entre os grupos experimentais. No Exp. 2, a motilidade não diferiu entre grupos ou entre curvas de congelação. Na curva C1, o grupo adicionado de vitamina C + Trolox apresentou mais células com acrossomas intactos, enquanto na C2 não houve diferença entre os grupos. O porcentual de acrossomas íntegros da curva 1, não diferiu entre os grupos controle (G1) e com vitamina C (G2), mas foram inferiores (P <0,05) ao de vitamina C + Trolox (G4), enquanto na curva 2, não houve diferença entre os grupos. Ao se comparar curvas de congelação encontrou-se diferença (P<0,05) no porcentual de acrossomas reagidos do G2 (vitamina C). Grandes porcentuais de espermatozóides apresentaram-se sem estresse oxidativo ou, quando ocorria, concentrava-se na peça intermediária das células. No Exp. 3, a motilidade espermática dos grupos diluídos com Tris-gema e Tris-gema + vitamina C + Trolox foram superiores aos demais grupos. Maior porcentual de células com acrossomas íntegros foi observado no grupo suplementado com vitamina C + Trolox. Amostras diluídas em Kenney (sem anti-oxidante) apresentaram maior porcentual de acrossomas íntegros do que as diluídas em Tris-gema (sem anti-oxidante). Observou-se maior formação de formazana na cabeça e cauda de células diluídas em Tris-gema + Trolox, do que nas diluídas em Kenney. Conclui-se que a vitamina C (1200M) e Trolox (200M de Trolox) podem ser utilizadas para congelação de sêmen de cão; A adição de vitamina C e Trolox em amostras diluídas em Tris-gema aumenta a viabilidade das células espermáticas congeladas a -15 oC/min e -10 oC/min nas curvas negativas; A suplementação de vitamina C + Trolox minimiza os efeitos deletérios da criopreservação do sêmen sobre a integridade do acrossoma espermático de amostras diluídas em Tris-gema.

ASSUNTO(S)

antioxidante sêmen cão esperma diluente vitamina c medicina veterinaria diluent vitamin c trolox oxidative stress dog trolox estresse oxidativo

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