Comparação de métodos de preservação de Atta spp. (Hymenoptera: Formicidae) para estudos com RAPD

AUTOR(ES)
FONTE

Anais da Sociedade Entomológica do Brasil

DATA DE PUBLICAÇÃO

2000-09

RESUMO

DNA de alta qualidade para estudos moleculares pode ser facilmente extraído de espécimes frescos. Entretanto, amostras frescas são difíceis de ser mantidas vivas por longos períodos tornando a sua preservação um sério problema, principalmente quando são coletadas e transportadas de locais distantes. Com o objetivo de estabelecer um método eficiente de preservação de Atta spp. (formigas cortadeiras) para extração de DNA visando análises de RAPD, seis diferentes métodos de armazenamento foram avaliados: 1) -70°C; 2) etanol 95% a -20°C; 3) etanol 95% a 4°C; 4) etanol 95% à temperatura ambiente; 5) sílica gel à temperatura ambiente; e 6) tampão (0,25 M EDTA, 2,5% SDS, 0,5 M Tris-HCl, pH 9,2) à temperatura ambiente. O DNA foi extraído (Cheung et al., 1993 - modificado) e examinado aos 90, 210 e 360 dias após o armazenamento. Espécimes frescos foram usados como controle. O DNA total foi medido com minifluorímetro. A qualidade do DNA foi determinada escaneando-se as fotos com densitômetro e a integral da varredura foi calculada para DNA > 9,4 kb. Os dados foram analisados usando o delineamento estatístico de blocos inteiramente casualizados com parcelas subdivididas e com quatro repetições. Todos os métodos foram eficientes para preservar Atta spp. até 210 dias. Até 360 dias, o DNA foi degradado somente em etanol 95% à temperatura ambiente, resultando na ausência de bandas no perfil RAPD quando comparado com os demais métodos de presevação. Embora a preservação a baixas temperaturas seja recomendada para longos períodos, o armazenamento em sílica gel e tampão pode ser considerado alternativa satisfatória quando refrigeração e transporte são fatores limitantes.

ASSUNTO(S)

insecta formiga saúva condições de armazenamento extração de dna

Documentos Relacionados