Clonagem molecular de uma nova Fosfolipase A2 Ãcida de Cascavel (Crotalus durissus cascavella) e anÃlise de sua expressÃo em serpentes submetidas ao estresse tÃrmico

AUTOR(ES)
DATA DE PUBLICAÇÃO

2008

RESUMO

CascavÃis mantidas em cativeiro sob estresse tÃrmico apresentam reduÃÃo na velocidade da digestÃo, alteraÃÃes quantitativa e qualitativa da peÃonha, o que sugere a modulaÃÃo de genes relacionados à aclimataÃÃo a baixas temperaturas. O presente trabalho visou clonar uma fosfolipase e avaliar a expressÃo de genes relacionados a estresse em glÃndulas de peÃonha de cascavÃis da espÃcie Crotalus durissus cascavella (Cdcasca) submetidas a estresse tÃrmico. Para tanto, a clonagem do cDNA de uma nova PLA2 foi realizada a partir da biblioteca de cDNA da glÃndula de peÃonha de Cdcasca. A seqÃÃncia de aminoÃcidos deduzida dessa PLA2 indica que essa se enquadra no grupo das PLA2s Ãcidas, da classe II, cujos membros apresentam atividade enzimÃtica. A fim de verificar o padrÃo de expressÃo apÃs estresse tÃrmico, os cDNA de glÃndulas de trÃs cascavÃis, provenientes da mesma ninhada, submetidas a extraÃÃo da peÃonha e, posteriormente, a temperaturas de 18ÂC (frio), 28 ÂC (controle) e 40 C (calor), por trÃs dias, foram preparados e os transcritos de PLA2 e de proteÃnas de choque tÃrmico (HSP70, HSP90, e HSF1) quantificados por PCR em tempo real. Os resultados mostraram que os nÃveis de transcritos de PLA2 foram 5,24 vezes mais altos nas glÃndulas de peÃonha da serpente mantida no frio em relaÃÃo ao controle, enquanto os transcritos de PLA2 das glÃndulas da serpente mantida no calor nÃo apresentaram diferenÃas significativas. Os nÃveis de transcritos das HSPs e seu fator de transcriÃÃo (HSF1) nÃo variaram de maneira apreciÃvel na amostras. Os resultados provaram, pela primeira vez, influÃncia da baixa temperatura na expressÃo de uma toxina na glÃndula de peÃonha de C. d. cascavella, sugerindo que essas serpentes podem adaptar a composiÃÃo da peÃonha à condiÃÃo de estresse tÃrmico

ASSUNTO(S)

crotalus durissus cascavella gene expression pla2 rt-pcr venom real-time pcr pla2 zoologia thermal stress composiÃÃo de peÃonha crotalus durissus cascavella estresse tÃrmico expressÃo de genes

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