Caracterização e otimização do líquido vesicular de Echinococcus granulosus bovino para utilização no imunodiagnóstico da hidatidose por ELISA

AUTOR(ES)

IRABUENA, Oscar, NIETO, Alberto, FERREIRA, Ana María, BATTISTONI, Julio, FERRAGUT, Gabriela

FONTE

Revista do Instituto de Medicina Tropical de São Paulo

DATA DE PUBLICAÇÃO

2000-10

RESUMO

O objetivo do presente trabalho foi testar a composição química do líquido hidático bovino (BHCF) obtido de cistos hidáticos férteis (FC) e não férteis (NFC). Oito lotes de FC e 5 de NFC foram preparados e testados quanto à composição química, proteínas totais, proteínas derivadas do hospedeiro, conteúdo de carbohidratos e lipídeos. Não foram observadas diferenças entre os dois primeiros parâmetros sendo que o conteúdo de carbohidratos e lipídeos foi maior nos lotes FC do que nos NFC. Por SDS-PAGE foram observadas bandas de 38 e 116 kD somente nos BHCF do FC. Foram preparados dois «pools» de BHCF, um de FC (PFC) e outro de NFC (PNFC). Os padrões de reconhecimento dos antígenos foram analisados por imunoblot. As condições físico-químicas para adsorção dos antígenos na superfície das placas de poliestireno (ELISA plates) foram otimizadas. O valor de diagnóstico de ambos tipos de BHCF bem como a importância diagnóstica da oxidação das moléculas de carbohidratos com periodato foram analisadas por ELISA usando 42 amostras de soro de pacientes com hidatidose, 41 de pacientes com outras doenças e 15 de doadores aparentemente saudáveis. A reatividade de todos soros contra antígenos nativos foi analisada com e sem fosforilcolina livre. A melhor eficiência diagnóstica foi observada usando BHCF de PFC tratado com periodato usando tampão glicina com forte força iônica para sensibilizar as placas de ELISA.

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