Caracterização e epidemiologia molecular de cepas de Klebsiella pneumoniae produtoras de ESBLs isoladas de pacientes do Hospital Universitário de Londrina, no período de 2000-2004

AUTOR(ES)
DATA DE PUBLICAÇÃO

2007

RESUMO

Klebsiella pneumoniae desempenha papel importante em infecções hospitalares causando, principalmente, pneumonia, sepse, infecção urinária e de ferida cirúrgica. Os objetivos deste estudo foram: determinar os perfis de resistência a antimicrobianos, caracterizar ESBLs (ß-lactamases de espectro ampliado), avaliar a similaridade genética, comparar técnicas de tipagem molecular bacteriana e pesquisar a presença de integrons, em 141 cepas de K. pneumoniae isoladas de pacientes do Hospital Universitário de Londrina, no período de cinco anos (2000-2004). Após determinados os perfis de resistência (Kirby-Bauer), foram definidas as CIMs (Concentrações Inibitórias Mínimas) aos antimicrobianos, utilizando o método de diluição em ágar (CLSI 2006). A produção de ESBLs foi confirmada utilizando os testes de associação com ácido clavulânico e de disco sinergismo. A pesquisa de genes de ß-lactamases blaTEM, blaSHV e blaCTX-M, foi realizada por PCR e sequenciamento; foi ainda realizada pesquisa de classes de integrons e caracterização do integron classe 1. Para determinar a similaridade genética entre as cepas foram utilizados métodos baseados em PCR e RFLP-PFGE. Todas as amostras apresentaram sensibilidade aos antimicrobianos imipenem, meropenem e cefoxitina. Presença de diferentes genes e combinações de genes que codificam enzimas nas cepas, foi observado, sendo blaCTX-M-2 o mais freqüente (131 isolados). A presença de integrons revelou: 131 (93%) cepas com integron classe 1; nove (6,4%) com classe 2 e sete (5%) cepas com ambas as classes. Não foi detectada a presença de integron classe 3. A caracterização do integon classe 1 transportando o gene blaCTX-M-2 demostrou tratar-se de um integron classe 1 incomum. Entre os métodos de tipagem, PFGE apresentou elevado índice de discriminação (DI) com 0,989, REP-PCR (0,969), combinação dos cinco métodos (0,999), combinação rep-PCR e RAPD (0,986); seguidos de RAPD (0,946), ERIC-PCR (0,938) e BOX-PCR (0,937). Nossos resultados sugerem que os métodos baseados em PCR são apropriados para análise inicial de cepas de K. pneumoniae e que RFLP-PFGE seria indicada para análise complementar. CTX-M-2 foi a ESBL prevalente em nossa região e os genes que a codificam encontram-se localizadas em um integron classe 1 incomum. Este integron já foi descrito transportando a mesma enzima na Argentina e no Uruguai, no entanto, este é o primeiro relato deste integron em nossa região, no Brasil. Nossos resultados sugerem que ESBLs, em K. pneumoniae, sobre tudo CTX-M-2 e SHV-5 são as enzimas mais freqüentes em nossa região. E que a multiplicidade de genótipos pode ser resultante da disseminação da enzima CTX-M-2 e de genes de resistência presentes em elementos genéticos móveis, incluindo integrons.

ASSUNTO(S)

epidemiologia molecular microbiologia streptococcus pneumoniae molecular epidemiology microbiology

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