Caracterização dos genes scMUTM1 e scMUTM2 de cana-de-açúcar

AUTOR(ES)

Viviane Katielly Silva Medeiros

DATA DE PUBLICAÇÃO

2007

RESUMO

As plantas são organismos particularmente susceptíveis aos efeitos genotóxicos devido a sua constante exposição a agentes do meio ambiente tais como a luz [incluindo a ultravioleta (UV)], o calor, a seca e diferentes substâncias químicas. Entretanto, existem diferentes mecanismos de reparo para detectar estas lesões e corrigi-las. Entretanto, em plantas estas vias são pouco compreendidas. Uma das vias é a por excisão de bases (BER). A proteína MUTM/FPG é uma DNA glicosilase da via BER que corrige danos oxidativos. No genoma da cana-de-açúcar foram encontrados dois possíveis cDNAs que possuem homologia de seqüência a esta proteína: scMUTM1 e scMUTM2. O objetivo deste trabalho foi caracterizar o papel destes genes em plantas. Para isto, o nível de expressão dos genes após estresse oxidativo foi avaliado através de RT-PCR semiquantitativo. Para obter a sequência completa dos gene, uma biblioteca de DNA genômico de cana-de-açúcar foi hibridizada com sondas radioativas para ambos cDNAs, encontrando-se dois clones em potencial. A região promotora foi clonada, seqüenciada e analisada. Dentro das seqüências obtidas para a região promotora de scMUTM2, estas podem ser divididas em seis grupos. Os motivos regulatórios foram identificados, tais como o TATA-box, CAAT-box, elementos de resposta ao estresse oxidativo e elementos de resposta à luz. Um outro ponto de interesse neste trabalho foi a caracterização da região N-terminal da proteína scMUTM1. Para isto, foram realizadas algumas construções via PCR. Estas construções foram posteriormente introduzidas em cepas selvagem (CC104) e duplo mutante (CC104mutMmutY) de Escherichia coli e foram realizados ensaios de complementação de modo a avaliar a importância de cada região para o reconhecimento e correção das lesões. Os resultados mostraram que as proteínas com deleções na porção N-terminal de scMUTM1 são capazes de complementar a deficiência de Fpg and MutY-glicosilase na bactéria CC104 mutMmutY reduzindo assim a freqüência de mutação espontânea

ASSUNTO(S)

cana-de-açúcar dna repair sugarcane reparo de dna dna glicosilase dna glycosylase genetica molecular e de microorganismos

Documentos Relacionados

• Prospecção e caracterização de genes associados ao processo de indução floral em cana-de-açúcar
• Virus do amarelecimento foliar da cana-de-açucar : caracterização da resposta fisiopatologica de tres variedades de cana-de-açucar
• Caracterização molecular e funcional de proteinas bZIPs de cana-de-açucar
• Produção recombinante e caracterização funcional de uma legumaína de cana-de-açúcar
• Clonagem, expressão recombinante e caracterização de uma serpina da cana-de-açúcar