Caracterização do Grb10 em complexos cumulus-oócito oriundos de folículos bovino de diferentes tamanhos
AUTOR(ES)
Rosa, Paulo Roberto Antunes da, Bohrer, Rodrigo Camponogara, Ludke, Charles Alencar, Cesaro, Matheus Pedroti De, Pereira, Gabriel Ribas, Mondadori, Rafael Gianela, Antoniazzi, Alfredo Quites, Gonçalves, Paulo Bayard Dias
FONTE
Cienc. Rural
DATA DE PUBLICAÇÃO
2015-05
RESUMO
O objetivo deste estudo foi investigar a expressão de RNAm e a localização da proteína Grb10 em complexos cumulusoócito (CCO), oriundos de folículos bovinos em diferentes fases de desenvolvimento. Primeiramente, foi investigada a expressão de RNAm e relacionada com as taxas de maturação. CCOs oriundos de folículos com diâmetro de 1-3, 4-6, 6-8 e >8mm foram utilizados para avaliar a expressão de RNAm por PCR em tempo real e para analisar os estádios de maturação nuclear. Foi observado que os oócitos mais competentes para a progressão meiótica (oriundos de folículos com diâmetro de 6-8 e >8mm; P<0.05) tiveram menor expressão de RNAm para Grb10, quando comparados aos CCOs oriundos de folículos com 1-3 e 4-6mm (P<0.05). Posteriormente, foi realizada a técnica de imunofluorescência em CCOs oriundos de folículos de diferentes tamanhos (1-3, 4-6, 6-8 e >8mm) para investigar a localização da proteína Grb10. As amostras foram incubadas com o anticorpo primário: anti-Grb10 policlonal, produzido em coelho (1:100). O anticorpo primário foi detectado utilizando um anticorpo secundário, IgG anti-coelho, produzido em cabra, conjugado com Alexa Fluor 488 (1:500). A fluorescência foi detectada em todas as amostras analisadas, porém, menos evidente nos CCOs oriundos dos folículos maiores. Os resultados apresentados neste estudo caracterizam o gene Grb10 em CCOs de bovinos e fornecem evidências do seu envolvimento na maturação molecular do oócito.
ASSUNTO(S)
o objetivo deste estudo foi investigar a expressão de rnam e a localização da proteína grb10 em complexos cumulus- [...] rnam proteína maturação oócito grb10.
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