Caracterização de células-tronco mesenquimais isoladas do líquido amniótico humano e submetidas ao processo de criopreservação.

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DATA DE PUBLICAÇÃO

2010

RESUMO

Introdução: no contexto da terapia celular, a criopreservação de células-tronco mesenquimais do líquido amniótico humano é de acentuada importância clínica, uma vez que essas células podem ser colhidas ainda no período pré-natal e podem ser armazenadas para serem usadas em tratamentos posteriores. Objetivos: este estudo teve como objetivo caracterizar as células-tronco mesenquimais cultivadas do líquido amniótico humano antes e após o processo de criopreservação, quanto à manutenção da sua capacidade de diferenciação multipotente, viabilidade e estabilidade cromossômica. Metodologia: foram incluídas nesta pesquisa amostras de 10 gestantes, as quais foram cultivadas, caracterizadas e submetidas à criopreservação por 150 dias. Para a caracterização celular, foram realizados ensaios de citometria de fluxo para determinar o perfil imunofenotípico das células cultivadas; diferenciação celular; determinação do cariótipo e viabilidade celular. Para verificação da manutenção das características celulares após criopreservação, as células foram descongeladas e, então, foram feitos novamente os ensaios de viabilidade celular, cultura, diferenciação celular e cariótipo. Com o intuito de verificar interferências da criopreservação sobre a expressão do gene associado à pluripotência, octamer 4 (OCT-4), foi quantificada a expressão desse gene antes e após criopreservação. Resultados: a caracterização dessas células demonstrou que aquelas cultivadas do líquido amniótico humano apresentam morfologia e perfil imunofenotípico característico das células-tronco mesenquimais e, além disso, têm a capacidade de diferenciação em células da linhagem mesodermal. Ainda, o estudo demonstrou que, a partir de técnicas de criobiologia, essas células podem ser criopreservadas durante pelo menos cinco meses e serem recuperadas após esse período, mantendo sua capacidade de crescimento in vitro e de diferenciação e mantendo, ainda, a expressão do gene OCT-4, indicando, assim, a manutenção de sua característica de célula-tronco. Além disto, a análise cariotípica dessas células indicou que tanto a cultura quanto a criopreservação não induziram surgimento de aberrações cromossômicas, fato importante para uma possível utilização terapêutica. Conclusão: este trabalho concluiu que a técnica de criopreservação de células do líquido amniótico pode ser ferramenta extremamente útil na manutenção da capacidade das células-tronco multipotentes recolhidas durante a gravidez.

ASSUNTO(S)

dissertações acadêmicas decs células-tronco mesenquimais decs obstetrícia teses. ginecologia teses. dissertação da faculdade de medicina da ufmg. citometria de fluxo decs criopreservação decs células cultivadas decs líquido amniótico decs células-tronco multipotentes decs

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