Caracterização de camundongos com expressão específica do receptor B1 de cininas no tecido adiposo. / Caracterization of mice expressing kinin B1 receptor only in adipose tissue

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DATA DE PUBLICAÇÃO

2010

RESUMO

O tecido adiposo representa um sítio primário de regulação da ingestão de alimentos, gasto energético e homeostase glicêmica do organismo. Assim, alterações no metabolismo dos adipócitos, pre-adipócitos e macrófagos, células que compõem esse tecido, podem resultar em modificações no grau de adiposidade e de tolerância à glicose. O receptor B1 de cininas tem sido descrito principalmente em processos inflamatórios. Foi visto ainda que este é expresso constitutivamente no tecido adiposo branco, onde parece induzir diferenciação de adipócitos e expressão de alguns genes envolvidos com o metabolismo lipídico e glicêmico. Demonstramos a presença e a funcionalidade do receptor B1 de cininas do tecido adiposo do animal transgênico através da metodologia de ensaio de competição com agonistas marcados radioativamente e através do ensaio de microfisiômetro. Posteriormente aos tratamentos, analisamos os parâmetros basais do animal transgênico com expressão específica do receptor B1 no tecido adiposo (aP2-B1/B1 -/-). Esse animal possui maior massa de tecido adiposo peri-epididimal quando comparado ao nocaute do receptor B1 (B1 -/-) e semelhante ao animal selvagem (B1 +/+), de massa do fígado e renal reduzida assim como o animal B1 -/-. Ao analisarmos o volume celular desse tecido, percebemos que o animal aP2-B1/B1 -/- possui células ainda menores que os animais B1 -/- que já são menores que as dos animais B1 +/+. Quando avaliamos a expressão gênica desse tecido observamos uma redução da expressão dos genes do CEBP-α, PPAR-γ. Além disso, quando comparamos os três grupos observamos que o grupo B1 -/- possui maior expressão de adiponectina que os demais. Dessa forma, já pudemos observar um fenótipo de diferenciado no animal aP2-B1/B1 -/-. Em seguida, esses animais foram submetidos à dieta hiperlipídica (DHL) para avaliarmos como o receptor B1 de cininas, presente no tecido adiposo, influencia o caráter de proteção à obesidade, visto no animal nocaute do receptor B1 de cininas. Foi observado que os animais aP2-B1/B1 -/-, assim como os B1 -/- são resistentes à obesidade induzida pela DHL. Entretanto, os animais aP2-B1/B1 - Resumo 18 /- são intolerantes à glicose diferentemente dos animais B1 -/- que são mais tolerantes. A expressão de GLUT-4 nos animais B1 -/- é maior quando comparada aos demais, o que explica a maior tolerância à glicose. Os animais B1 +/+ (selvagem) têm maior concentração que plasmática de triglicérides que os demais. Observamos que camundongos aP2-B1/B1 -/- , assim como os B1-/- apresentam uma baixa expressão do mRNA da leptina no tecido adiposo branco e níveis menores de leptina plasmática, sendo ambas aumentadas pela dieta hiperlipídica (DHL). Verificamos que os animais aP2-B1/B1 -/- apresenta adipócitos menores, mesmo após a DHL. Além disso, esses têm maior expressão de Pref-1, que explica a inibição da diferenciação celular, assim como menor expressão de CEBP-α e PPAR-γ quando comparado ao animal B1 -/- que têm maior expressão desses genes. Esses resultados indicam que o animal aP2- B1/B1 -/- tem menor diferenciação celular, enquanto o animal B1 -/- tem maior diferenciação celular. Realizamos ainda o estudo dos macrófagos dos animais. Quantificamos e analisamos o tipo de ativação celular desses macrófagos, que podem ter importante papel no metabolismo. Os animais aP2-B1/B1 -/- apresentam menor número de macrófagos residentes no tecido adiposo periepididimal, enquanto os animais B1 +/+ e B1 -/- apresentam o mesmo número. Além disso, quando macrófagos diferenciados da medula desses animais foram submetidos a ensaio de fagocitose estimulado por LPS, os animais B1 -/- apresentaram menor índice fagocítico. Realizamos a dosagem de citocinas produzidas pelos macrófagos no meio de cultura e verificamos que os macrófagos provenientes dos animais B1 -/- produzem maior concentração de IL-10, sugerindo uma resposta protetora à obesidade. Desse modo, nossos resultados sugerem que o animal aP2-B1/B1 -/- é resistente à DHL, intolerante à glicose, com adipócitos menores e adipogênese inibida. Além de possuírem menor número de macrófagos no tecido adiposo peri-epididimal.

ASSUNTO(S)

cininas biofisica molecular adipócitos obesidade transgênicos

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