Caracterização bioquímica e funcional de uma nova Thrombin-like isolada da peçonha de Bothrops pauloensis

AUTOR(ES)
DATA DE PUBLICAÇÃO

2008

RESUMO

Serinoproteases isoladas de peçonhas ofídicas têm um importante papel na formação e dissolução de coágulos. Essas toxinas principalmente, as enzimas thrombinlike afetam o sistema hemostático resultando em incoagulabilidade sanguínea. No presente estudo, uma enzima thrombin-like nomeada Tl-Bp foi isolada de Bothrops pauloensis e características bioquímicas, enzimáticas e farmacológicas foram determinadas. Tl-Bp é uma glicoproteína que contém ambos, carboidratos N-ligados e ácido siálico na estrutura, possui PM = 34 kDa sob condições redutoras e pI ~ 6,4. A seqüência N-terminal da enzima (VIGGDECDINEHPFL) mostrou alta similaridade quando comparada com outras toxinas thrombin-like isoladas de peçonhas ofídicas. Tl-Bp mostrou alta atividade coagulante sobre os plasmas bovino e humano e foi inibida por PMSF, benzamidina e leupeptina. Além disso, mostrou estabilidade quando examinadas em diferentes temperaturas (- 70C a 37C), pHs (3 a 9) e presença de íons metálicos divalentes (Ca2+, Mg2+, Zn2+ e Mn2+). Tl-Bp mostrou alta atividade catalítica sobre substratos naturais como o fibrinogênio e sintético, tais como o TAME, S-2238 e S-2288, além disso, mostrou atividade calicreína-like, mas foi incapaz de atuar sobre o S-2765 e substrato da plasmina. A enzima não demonstrou atividade hemorrágica, miotóxica, indução de edema e agregação plaquetária, assim como atividade proteolítica sobre a caseína. Analisados juntos, nossos resultados mostram que Tl-Bp é uma nova isoforma de enzima thrombin-like isolada da peçonha de Bothrops pauloensis.

ASSUNTO(S)

snake venom thrombin-like enzymes coagulação genetica bothrops pauloensis atividade proteolítica serpente peçonhenta - peçonha proteolytic enzymes peçonhas de serpentes enzimas thrombin-like bothrops blood coagulation

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