Avaliação de métodos bioquímicos e sorológicos na identificação e agrupamento de espécies de Candida por CHROMagar Candida, SDS-PAGE e ELISA
AUTOR(ES)
Rodrigues, J. A. de O., Höfling, J. F., Tavares, F. C. A., Duarte, K. M. R., Gonçalves, R. B., Azevedo, R. A.
FONTE
Brazilian Journal of Biology
DATA DE PUBLICAÇÃO
2004-05
RESUMO
Este trabalho teve o propósito de avaliar métodos bioquímicos e sorológicos para serem aplicados na caracterização e identificação de linhagens do gênero Candida isoladas da cavidade bucal. As cepas empregadas representam cinco espécies de Candida previamente identificadas: C. albicans, C. guilliermondii, C. parapsilosis, C. krusei e C. tropicalis, utilizando como controle negativo Kluyveromyces marxianus. Foram empregadas as técnicas de gel de poliacrilamida (SDS-PAGE) associado à análise estatística em software, CHROMagar Candida (CA), meio cromogênico diferencial descrito para o isolamento e identificação presuntiva de leveduras de importância clínica e um ensaio de imunoabsorção ligado a enzima (ELISA), utilizando antissoro produzido contra extratos protéicos de uma linhagem-padrão de Candida e um isolado de cavidade oral de C. albicans. O método mostrou-se adequado para a identificação presuntiva de C. albicans, C. tropicalis e C. krusei, com 100% de sensibilidade e especificidade, com base na coloração e textura das colônias. O método de ELISA utilizando imunoglobulinas G purificadas apresentou alto teor de reação cruzada com as outras espécies de Candida estudadas. A análise do perfil protéico por SDS-PAGE permitiu agrupar os isolados da cavidade oral por intermédio do coeficiente "Simple Matching", S SM = 1,0. Os perfis protéicos analisados por SDS-PAGE ampliam os conhecimentos sobre as relações taxonômicas de leveduras isoladas da cavidade oral. Esta metodologia demonstra boa reprodutibilidade e origina informações úteis para aplicação clínica e estudos que envolvem a sistemática e a epidemiologia.
ASSUNTO(S)
espécies de candida eletroforese de proteínas análise numérica meio cromogênico (chromagar candida) ensaio imunoenzimático (elisa)
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