AvaliaÃÃo de anticorpos monoclonais reativos aos antÃgenos P30, P22 e P97 de Toxoplasma gondii, em ensaio imunoenzimÃtico reverso, utilizados na detecÃÃo de anticorpos IgG, IgM e IgA para o sorodiagnÃstico da Toxoplasmose Humana

AUTOR(ES)
DATA DE PUBLICAÇÃO

2006

RESUMO

O diagnÃstico da toxoplasmose se baseia na detecÃÃo de anticorpos especÃficos em amostras de soro de pacientes, por meio de tÃcnicas sorolÃgicas, particularmente as imunoenzimÃticas. As maiores dificuldades na interpretaÃÃo destes testes referem-se aos resultados falso-positivos e falso-negativos, principalmente com relaÃÃo à detecÃÃo de anticorpos IgM e IgA anti-Toxoplasma gondii, tornando difÃcil o estabelecimento do diagnÃstico da infecÃÃo primÃria e infecÃÃo congÃnita. O presente trabalho objetivou avaliar a utilizaÃÃo de anticorpos monoclonais (mAbs) A3A4 (anti-p30), A4D12 (antip22) e 1B8 (anti-p97) em um ensaio imunoenzimÃtico (ELISA) reverso para a detecÃÃo de anticorpos IgG, IgM e IgA contra os antÃgenos p30, p22 e p97 de T. gondii em soros humanos. Foram analisadas 175 amostras de soros de pacientes com infecÃÃo recente (n=45), na fase de transiÃÃo (n=40) e com infecÃÃo crÃnica (n=55), bem como de indivÃduos soronegativos (n=35), definidos por testes sorolÃgicos convencionais. Os resultados obtidos por ELISA reverso usando mAbs (ELISA-mAb) foram comparados aos do ELISA indireto clÃssico usando antÃgeno solÃvel de T. gondii (ELISA-STAg). O mAb A3A4 reconhece um epÃtopo conformacional no antÃgeno de superfÃcie p30, enquanto os mAbs A4D12 e 1B8 reconhecem epÃtopos lineares, respectivamente, no antÃgeno de superfÃcie p22 e no antÃgeno citoplasmÃtico p97 de taquizoÃtas de T. gondii. Em testes ELISA de inibiÃÃo utilizando soros positivos para competir com os mAbs pela ligaÃÃo a seus respectivos antÃgenos, o mAb A3A4 apresentou maior capacidade de competiÃÃo que os mAbs A4D12 e 1B8. Os resultados dos ELISA-mAbs A3A4 e A4D12 para a detecÃÃo de IgG anti-p30 e anti-p22, respectivamente, foram altamente correlacionados com aqueles obtidos pelo ELISA-STAg. Em relaÃÃo à detecÃÃo de IgM e IgA, os resultados do ELISA-mAb A4D12 (anti-p22) foram mais correlacionados com aqueles determinados pelo ELISA-STAg. ELISA-mAb 1B8 nÃo mostrou associaÃÃes significativas com ELISA-STAg para todos os isotipos de anticorpos analisados. Em conclusÃo, a detecÃÃo de anticorpos IgG, IgM e IgA especÃficos aos antÃgenos p30, p22 e p97 de T. gondii foi demonstrada, pela primeira vez, utilizando um ELISA reverso com mAbs que capturam estes antÃgenos presentes no STAg. Desta forma, os ELISAmAbs A3A4 e A4D12 para a captura dos antÃgenos p30 e p22 mostraram representar mÃtodos alternativos para a detecÃÃo de anticorpos especÃficos a T. gondii e podem ser considerados como ferramentas adicionais para um diagnÃstico mais seguro da toxoplasmose, particularmente nos casos de infecÃÃo primÃria e congÃnita.

ASSUNTO(S)

toxoplasma gondii anticorpos monoclonais serodiagnosis reverse elisa imunologia elisa indireto monoclonal antibodies toxoplasmose sorodiagnÃstico elisa reverso indirect elisa

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