Análise de frações antigênicas da forma metacestódea de Taenia solium, obtidas pelo Triton X-114 e por cromatografia de afinidade, no diagnóstico sorológico da neurocisticercose humana

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DATA DE PUBLICAÇÃO

2008

RESUMO

A neurocisticercose (NC) causada pela forma metacestódea de Taenia solium freqüentemente acomete o sistema nervoso central podendo ser confundida com outras síndromes neurológicas. O diagnóstico sorológico da NC é de grande importância na rotina laboratorial porque auxilia no diagnóstico de pacientes que apresentam sinais clínicos e radiológicos compatíveis com esta doença. A utilização de antígenos purificados tem permitido o desenvolvimento de testes mais sensíveis e específicos, resultando em estudos soroepidemiológicos e de triagem mais confiáveis. Processos de purificação antigênica utilizando Triton X-114 (TX-114) e cromatografia de afinidade consistem em técnicas simples e de baixo custo. O objetivo deste estudo foi caracterizar e comparar diferentes frações antigênicas da forma metacestódea de T. solium obtidos por separação de fases usando TX-114 e cromatografia de afinidade para o sorodiagnóstico da NC humana. Foram analisadas 132 amostras de soro, sendo 40 de pacientes com NC, 62 de pacientes com outras parasitoses e 30 de indivíduos aparentemente saudáveis. O extrato salino total (S) e o líquido de vesícula (LV) foram submetidos ao processo de fracionamento utilizando TX-114 para a obtenção das frações antigênicas: detergente (DS e DLV, respectivamente) e aquosa (AS e ALV, respectivamente). O extrato S foi purificado em colunas de jacalina e N-acetilglicosamina, sendo apenas a fração não ligante de jacalina (FNL-J) submetida à coluna de concanavalina A (ConA) e fracionamento com TX-114. Todos antígenos foram analisados em SDS-PAGE 12% e corados pela prata para visualização das bandas antigênicas. As amostras de soro foram avaliadas para detecção de IgG pelo teste ELISA na diluição de 1:200 e pelo immunoblotting na diluição de 1:100. Sensibilidade, especificidade, eficiência do diagnóstico e Índice de Youden foram calculados para o teste ELISA. As sensibilidades e especificidades dos testes ELISA foram: 92,5% e 84,8% (S); 92,5% e 92,4% (DS); 67,5% e 70,6% (AS); 82,5% e 85,9% (LV); 77,5% e 72,8% (DLV); 80,0% e 80,4% (ALV); 85,0% e 84,8% (FNL-J); 92,5% e 93,5% (DFNL-J); 82,5% e 82,6% (AFNL-J), respectivamente. A eficiência do diagnóstico e o Índice de Youden dos testes ELISA foram: 87,1% e 0,77 (S); 92,4% e 0,85 (DS); 69,7% e 0,38 (AS); 84,8% e 0,68 (LV); 74,2% e 0,50 (DLV); 80,3% e 0,60 (ALV); 84,8% e 0,70 (FNL-J); 93,2% e 0,86 (DFNL-J); 82,6% e 0,65% (AFNL-J), respectivamente. No immunoblotting a banda de 70-50 kDa foi detectada em todas as amostras de soro de pacientes com NC para a fração DFNL-J, enquanto nenhuma reatividade foi observada para esta fração antigênica nas amostras de pacientes com outras parasitoses ou indivíduos saudáveis. Concluindo, a fração DFNL-J foi mais sensível e específica que os outros extratos, sendo capaz de diferenciar pacientes com NC daqueles com outras parasitoses, particularmente nas infecções por Echinococcus granulosus.

ASSUNTO(S)

triton x-114 taenia diagnosis imunologia aplicada triton x-114 neurocysticercosis taenia solium cromatografia de afinidade neurocisticercose taenia solium affinity chromatography

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