Análise da diversidade bacteriana associada ao biofilme dentário por polimorfismo de comprimento de fragmentos terminais de restrição (T-RFLP) / Analysis of bacterial diversity associated with dental biofilm by Terminals Restriction Fragment Length Polymorphism(T-RFLP
AUTOR(ES)
Italo Sarto Carvalho Rodrigues
FONTE
IBICT - Instituto Brasileiro de Informação em Ciência e Tecnologia
DATA DE PUBLICAÇÃO
06/07/2011
RESUMO
As comunidades bacterianas presentes na cavidade bucal desempenham papel importante no equilíbrio saúde/doença em seres humanos. Nesse sentido, o estudo da composição de microambientes orais pode contribuir para uma melhor precisão no diagnóstico de doenças infecciosas e, consequentemente, para o desenvolvimento de abordagens terapêuticas mais eficazes. A periodontite é uma doença dos tecidos de suporte do dente, caracterizada por resposta imunológica exacerbada do hospedeiro, frente à presença bacteriana no biofilme dentário. A grande diversidade bacteriana observada na cavidade bucal, aliada aos variados quadros clínicos da periodontite, ressaltam a necessidade de investigações mais aprofundadas sobre a composição bacteriana periodontopatogênica. O objetivo deste trabalho é a caracterização da comunidade bacteriana associada ao biofilme periodontopatogênico, pelo uso da técnica de Polimorfismos de Comprimento de Fragmentos Terminais de Restrição (T-RFLP). Amostras de biofilme dentário supragengival e subgengival foram coletadas de 11 pacientes portadores de periodontite. O DNA amostral foi extraído e submetido à Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) direcionada ao gene ribossomal 16S, utilizando-se iniciador senso marcado com molécula repórter fluorescente. Os produtos da PCR foram digeridos pelas endonucleases tetraméricas HhaI, MspI e RsaI e os fragmentos terminais de restrição (T-RFs) resultantes foram analisados em um sequenciador automatizado de DNA, gerando diferentes perfis de fragmentos para cada amostra. Ao todo, 19 T-RFs distintos foram detectados com a enzima RsaI (média = 6,4), 61 com MspI (média = 19,3) e 63 com HhaI (média = 16,3). Uma grande variabilidade nos perfis de restrição foi observada, sendo que 51% a 63% dos T-RFs foram detectados em menos de quatro amostras. A predição taxonômica de T-RFs in silico demonstrou a presença de gêneros bacterianos reconhecidamente periodontais, incluindo Actinomyces, Eubacterium, Fusobacterium, Haemophilus, Porphyromonas, Prevotella e Propionibacter. Embora alguns gêneros tenham sido encontrados em todas as amostras avaliadas, as análises de clusterização e estatística multivariada não demonstraram agrupamentos de perfis T-RFLP conforme paciente ou sítio amostral. Os resultados do estudo permitem concluir que a comunidade bacteriana do biofilme periodontopatogênico é bastante variável entre indivíduos, embora possua alguns gêneros predominantes
ASSUNTO(S)
doença periodontal biologia molecular placa dentária periodontal disease infection molecular biology dental plaque
ACESSO AO ARTIGO
http://libdigi.unicamp.br/document/?code=000817590Documentos Relacionados
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