A comparison between enzyme immunoassay and HPLC for ochratoxin A detection in green, roasted and instant coffee
AUTOR(ES)
Fujii, Simone, Ono, Elisabete Yurie Sataque, Ribeiro, Ricardo Marcelo Reche, Assunção, Fernanda Garcia Algarte, Takabayashi, Cássia Reika, Oliveira, Tereza Cristina Rocha Moreira de, Itano, Eiko Nakagawa, Ueno, Yoshio, Kawamura, Osamu, Hirooka, Elisa Yoko
FONTE
Brazilian Archives of Biology and Technology
DATA DE PUBLICAÇÃO
2007-03
RESUMO
ELISA competitivo indireto (ic-ELISA) baseado em anticorpos monoclonais foi desenvolvido para a detecção de ocratoxina A (OTA) em café verde, torrado e instantâneo. Os reagentes imunológicos necessários à reação consistiram de OTA-BSA (4,76 mg/mL), anti-OTA.7 MAb (diluído 2x10³) e anti IgG-HRP (diluído 10³), apresentando limite de detecção de 3,73 ng OTA/g. Os coeficientes de correlação (r) entre o imunoensaio e cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) foram de 0,98 (café verde), 0,98 (torrado) e 0,86 (instantâneo). Ic-ELISA detectou valores superestimados de OTA em relação a CLAE, com valor ELISA/CLAE variando de 0,66 - 1,46 (café verde), 0,96 - 1,11 (torrado) e 0,93 - 1,82 (instantâneo). As recuperações médias de OTA adicionada em café (5 - 70 ng/g) foram de 81,53 % (café verde), 46,73 % (torrado) e 64,35 % (instantâneo) por ELISA, em relação a 80,54 %, 45,91 % e 55,15 % por CLAE, respectivamente. A interferência de matriz no imunoensaio foi minimizada pela diluição das amostras previamente à análise por ELISA. O ic-ELISA desenvolvido pode ser considerado uma técnica alternativa simples, sensível e específica para análise de OTA, contribuindo para a qualidade e segurança de produtos de café.
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