Produção in vitro de embriões na espécie ovina : efeito do benzoato de estradiol na aspiração folicular e transporte de gametas e embriões em longas distâncias

AUTOR(ES)
FONTE

IBICT - Instituto Brasileiro de Informação em Ciência e Tecnologia

DATA DE PUBLICAÇÃO

25/03/2011

RESUMO

O objetivo do presente trabalho foi comparar o número de folículos, oócitos e a taxa de recuperação em ovelhas submetidas ao protocolo One Shot com e sem o uso do Benzoato de Estradiol; e com base nos resultados do primeiro experimento, utilizou-se o melhor protocolo hormonal para obtenção de oócitos e assim relatar a viabilidade do transporte de gametas femininos e embriões ovinos produzidos in vitro por longas distâncias. No primeiro experimento utilizou-se 33 ovelhas pluríparas, mestiças (1/2 sangue Texel), lanadas, não lactantes, idade média 5 anos e com ECC 3,0±0,3 que foram divididas em 3 grupos. O grupo One Shot (n=10) recebeu 1,5 mg de norgestomet (Crestar®, Intervet, Holanda) no D0 e este foi mantido por 10 dias. No D8 foi administrado 0,04mg de D-cloprostenol sódico (Preloban®, Intervet, Holanda), 200 UI FSH (Pluset®, Hertape Calier, Espanha) e 300 UI de eCG (Folligon®, Intervet, Holanda). No grupo Benzoato (n=11), a única diferença em relação ao grupo One Shot foi a administração de 0,6 mg de benzoato de estradiol (Estrogin®, Famavet, Brasil) em D0. No Grupo Sem Tratamento (n =12) os animais não receberam nenhum estímulo hormonal. A coleta dos oócitos foi realizada através de laparotomia 36 horas (D10) após a administração das gonadotrofinas. Foi observado aumento (P<0,05) na média de folículos aspirados no grupo One Shot em relação ao grupo sem estímulo hormonal e o Benzoato (16,3±5,6; 9,5±2,4 e 12,1±4,1). As médias de oócitos recuperados e a taxa de recuperação foram superiores (P<0,05) no grupo One Shot e no Benzoato em relação ao grupo Sem Tratamento, resultando em 14,2±9,0/87,1% (142/163); 11,0±6,2 /91,4% (122/134) e 6,8±3,5 /71,9% (82/114), respectivamente. No segundo experimento, foram utilizadas 5 ovelhas pluríparas da raça Santa Inês com ECC médio de 3,0 que foram submetidas a tratamento hormonal One Shot. A aspiração folicular (OPU) foi via laparotomia. Os oócitos selecionados foram envasados em TCM 199 (Nutricell, Brasil), gaseificados com CO2. e armazenados em incubadora de transporte (WTA, Sorocaba, São Paulo) com ambiente controlado em 38,5 °C e 5% de CO2. O transporte dos oócitos por 583 km foi realizado por meio rodoviário durante 14 horas até o laboratório de produção in vitro de embriões (PIVE), onde os oócitos completaram o período de maturação, foram fecundados com a mesma partida de sêmen e tiveram o cultivo iniciado em meio de cultivo SOF ovine. Após 4 dias, os embriões foram submetidos ao trajeto de retorno e enviados nas mesmas condições de transporte. Obtevê-se uma média de 9,8 ± 3 (49 / 5) embriões por doadora e 25 mórulas da Grau I foram transferidas em 7 receptoras, sendo 3 a 4 embriões no estágio de mórula, no ápice do corno uterino ipslateral ao corpo lúteo. O diagnóstico de gestação foi realizado por ultrassonografia transretal 30 dias após a transferência. Uma prenhez (14,3% - 1/7) foi confirmada de uma receptora que apresentava 4 CLs. Um cordeiro saudável nasceu de parto eutócico após período gestacional normal. Os resultados demonstram que o One Shot foi o melhor protocolo para obtenção de oócitos e é possível obter-se prenhez a partir da PIVE, com transportes de oócitos e embriões por até 14 horas.

ASSUNTO(S)

ovino - fertilização in vitro ovino - embrião hormônios - ovino estradiol transferência de embriões sheep fertilization in vitro sheep embryos

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