CONSERVAÇÃO in vitro DE Euterpe edulis MARTIUS ATRAVÉS DA EMBRIOGÊNESE SOMÁTICA / IN VITRO CONSERVATION OF Euterpe edulis MARTIUS THROUGH SOMATIC EMBRYOGENESIS

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DATA DE PUBLICAÇÃO

2007

RESUMO

O palmiteiro (Euterpe edulis Mart.), uma espécie característica da Mata Atlântica, foi drasticamente reduzido, devido à ação antrópica em diversas populações. A exploração indiscriminada resultou em erosão genética nas populações, não permitindo mais a manutenção da estrutura demográfica, através da regeneração natural. A única forma de propagação do palmiteiro é através de produção de sementes, as quais não toleraram armazenamento por longos períodos. Desta maneira, o desenvolvimento de estratégias para a conservação de germoplasma tornou-se necessário. Como o palmiteiro não apresenta um sistema de propagação vegetativa natural, a técnica de cultura de tecidos mostrou-se adequada tanto para a conservação, quanto para a multiplicação em larga escala de germoplasma. A informação da distribuição geográfica dos recursos genéticos tem sido fundamental na formulação de estratégias de conservação in situ, bem como no auxílio para a coleta de material vegetal e estabelecimento de bancos de germoplasma ex situ. O objetivo geral do presente estudo foi elucidar alguns aspectos da embriogênese somática, e analisar a germinação in vitro de embriões zigóticos imaturos de palmiteiro, visando à conservação ex situ de germoplasma de palmiteiro. No primeiro estudo, embriões zigóticos e bainhas foliares serviram como fonte de explantes. Embriões zigóticos foram inoculados em meio MS (MURASHIGE e SKOOG, 1962), suplementado com as vitaminas de Morel (MOREL e WETMORE, 1951), 2,4-D (0, 30, 35, 40 mg.L-1), 3 mg.L-1 de 2iP, 0,5 g.L-1 de glutamina, 0,5 g.L-1 de carvão ativado, 30 g.L-1 de glicose ou sacarose e, geleificado com 5 g.L-1 de ágar. O delineamento experimental foi em Blocos ao acaso, em que os tratamentos constaram de quatro concentrações de 2,4-D, combinados com duas fontes de carboidrato em esquema fatorial (4x2), em 6 repetições. Cada parcela foi constituída por dois tubos de ensaio, com um embrião cada. Bainhas foliares, extraídas de plântulas germinadas in vitro, foram inoculadas em meio MS, suplementado com Picloram (72,3 mg.L-1) ou 2,4-D (66,3 mg.L-1), 3 mg.L-1 de 2iP, glutamina (0; 0,29; 0,58; 1,17 g.L-1), 1,5 g.L-1 de carvão ativado, sendo geleificado com 2,5 g.L-1 de Phytagel. O delineamento foi em Blocos ao acaso, com 8 tratamentos, em 3 repetições. Cada parcela foi constituída por três placas de Petri, com 10 secções transversais das bainhas foliares. Embriões somáticos indiretos foram induzidos a partir de embriões zigóticos, em meio suplementado com 40 mg.L-1 de 2,4-D e 30 g.L-1 de sacarose. Verificou-se elevada formação de calos em bainhas foliares, utilizando o meio MS suplementado com 1,17 g.L-1 de glutamina e 66,3 mg.L-1 de 2,4-D. No segundo estudo, o objetivo foi elucidar a influência da concentração salina e da sacarose no meio de cultura, durante a germinação de embriões zigóticos, e estudar a influência da adição de diferentes concentrações de Cloreto de cálcio ao meio de cultura MS, na indução de embriogênese somática, em embriões zigóticos imaturos de E. edulis. A avaliação da germinação in vitro de embriões zigóticos de E. edulis ocorreu através da inoculação, em meio de cultura adicionado das vitaminas de Morel, 7 g.L-1 de ágar e 1,5 g.L-1 de carvão ativado. Os tratamentos foram diferentes concentrações do meio MS (MS e MS/2), combinados com diferentes concentrações de sacarose (20, 30 e 40 g.L-1). Foi utilizado o delineamento em Blocos ao acaso, em 6 repetições, cada repetição foi constituída por cinco tubos de ensaio, contendo um embrião cada. Para a indução de embriogênese somática, embriões zigóticos imaturos foram extraídos e inoculados em meio de cultura MS, suplementado com as vitaminas de Morel, 7 g.L-1 de ágar, 0,5 g.L-1 de glutamina, 3 mg.L-1 de 2iP, 100 mg.L-1 de 2,4-D e 1,5 g.L-1 de carvão ativado, além de diferentes concentrações de Cloreto de cálcio (0, 2, 4, 8, 12 mM). Utilizou-se o delineamento estatístico em Blocos ao acaso, em 6 repetições. Cada parcela foi constituída por um frasco, contendo quatro embriões zigóticos imaturos. Para a conversão dos embriões somáticos em plântulas, foram empregados o meio de cultura MS completo, e o com a metade da concentração salina original (MS/2). Verificou-se que a germinação de embriões zigóticos de palmiteiro não foi afetada pela concentração salina do meio de cultura e de sacarose. Entretanto, o crescimento em altura e a produção de massa fresca das plântulas foram afetados pelos tratamentos. O aumento da concentração de sacarose, de 20 para 40 g.L-1, no meio de cultura, resultou em acréscimo na massa fresca das plântulas. A composição dos diferentes meios de cultura não influenciou o número médio de raízes por plântula de palmiteiro. A indução de embriogênese somática em embriões zigóticos imaturos de E. edulis não foi influenciada significativamente pela adição de diferentes concentrações de Cloreto de cálcio ao meio de cultura, aos 60 dias. Entretanto, foram observadas diferenças significativas entre as diversas concentrações de Cloreto de cálcio, quanto ao número de embriões somáticos formados, aos 150 dias. O aumento na concentração de Cloreto de cálcio, no meio de cultura, resultou em decréscimo no número médio de embriões somáticos de palmiteiro produzidos. Os meios de cultura MS e MS/2 não diferiram significativamente, quanto à capacidade de germinação dos embriões somáticos. O processo de indução de embriogênese somática, em embriões zigóticos imaturos de E. edulis, ocorreu diretamente a partir do nó cotiledonar. O presente estudo evidenciou que a suplementação do meio de cultura (MS ou MS/2) com sacarose (30 ou 40 g.L-1) foi necessária para o desenvolvimento das plântulas de palmiteiro, oriundas de embriões zigóticos imaturos. Resultados confirmaram a possibilidade de propagar a palmeira E. edulis através da embriogênese somática direta, pois foram produzidas plântulas completas, além de demonstrarem a importância da suplementação do meio de cultura com uma fonte de nitrogênio orgânico, na morfogênese in vitro de bainhas foliares de palmiteiro.

ASSUNTO(S)

geociencias micropropagation culture of embryos conservação de germoplasma heart of palm cultura de embriões germplasm conservation micropropagação palmiteiro

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