AvaliaÃÃo de fraÃÃes hidrofÃbicas e hidrofÃlicas de brucella abortus em ensaios imunoenzimÃticos para caracterizar o perfil de anticorpos produzidos por bovinos vacinados e nÃo-vacinados

AUTOR(ES)
DATA DE PUBLICAÇÃO

2006

RESUMO

FraÃÃes hidrofÃbicas e hidrofÃlicas de Brucella abortus, obtidas a partir da extraÃÃo de lipopolissacarÃdeos de formas lisas (S-LPS) e por detergente nÃo-aniÃnico (Triton X-114), respectivamente, foram avaliadas em ensaios imunoenzimÃticos com o objetivo de caracterizar o perfil de anticorpos produzidos por bovinos vacinados com B. abortus S19 e animais soropositivos nÃo-vacinados. Foram empregados o teste imunoenzimÃtico indireto (iELISA), utilizando-se ProteÃna A ou anti-IgG bovina marcadas com peroxidase como conjugados, bem como os testes immunoblot e immunoblot-avidez. Quatro grupos de 15 amostras de soros bovinos previamente analisados por testes tradicionais de aglutinaÃÃo foram estudados: (I) bovinos soropositivos nÃo vacinados procedentes de Ãrea endÃmica para Brucella; (II) bovinos soropositivos nÃo vacinados procedentes de Ãrea nÃo endÃmica para Brucella; (III) novilhas vacinadas com B. abortus S19 e procedentes de Ãrea endÃmica; e (IV) bovinos soronegativos nÃo vacinados procedentes de Ãrea nÃo endÃmica. O valor limiar do Ãndice ELISA (IE) para ser considerado como um resultado positivo foi selecionado mediante a anÃlise TG-ROC (two-graph receiver operating characteristic). Os testes iELISA foram mais capazes de identificar novilhas vacinadas como animais negativos (87%) em relaÃÃo aos testes clÃssicos de aglutinaÃÃo (13%). NÃveis de anticorpos IgG anti-S-LPS de B. abortus foram maiores em bovinos nÃo vacinados soropositivos (grupos I e II) quando ProteÃna A/peroxidase foi empregada, refletindo uma predominÃncia de anticorpos da subclasse IgG2. Immunoblot-avidez utilizando a fraÃÃo hidrofÃlica Triton X-114 de B. abortus revelou uma significativa queda de reatividade para bandas antigÃnicas imunodominantes (57, 43 e 35 kDa) reconhecidas por amostras de soros de novilhas vacinadas, refletindo a presenÃa de anticorpos vacinais de baixa avidez para estes marcadores antigÃnicos. Pode-se concluir que o teste iELISA com S-LPS de B. abortus utilizando ProteÃna A/peroxidase como conjugado demonstrou ser uma importante ferramenta para diferenciar a sÃntese de anticorpos induzida pela resposta à vacina S19 em comparaÃÃo com a sÃntese induzida pela infecÃÃo natural, devido à detecÃÃo preferencial da subclasse IgG2. AlÃm disso, o perfil de reatividade de anticorpos IgG especÃficos para B. abortus por immunoblot-avidez demonstrou que anticorpos vacinais apresentaram baixa avidez para componentes com massa molecular aparente de 57, 43 e 35 kDa, constituindo-se em potenciais marcadores antigÃnicos para diferenciar bovinos vacinados dos animais com infecÃÃo natural.

ASSUNTO(S)

brucella abortus triton x-114 avidity-immunoblot imunologia aplicada ielisa s-lps cattle immunoblot-avidez bovinos brucelose em bovino

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